作者：陈伟岳 俞勇 杜蓬

【摘要】

目的   探讨丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）、酶联免疫检测（ELISA）在丙型肝炎早期诊断中的应用价值。

方法 83例抗-HCV阳性、500例ALT异常但抗-HCV阴性血清同时进行HCV-cAgELISA和HCV-PCR。

结果 83例抗-HCV阳性血清中HCV-cAg和HCV RNA阳性分别为33例和36例，其中32例共阳性；500例ALT异常但抗-HCV阴性的血清中有3例HCV-cAg和HCV RNA同为阳性。抗-HCV阳性和阴性血清HCV-cAg和HCV RNA检测结果符合率分别为94.0%和100%。

结论  HCV-cAgELISA敏感性与HCV-PCR类似，能够有效缩短窗口期，操作简便，费用低廉，在丙型肝炎早期诊断中具有很好的前景。

一、资料与方法

1.1样本来源 

83份抗-HCV阳性血清来自宁波市中心血站无偿献血者，年龄18~55周岁，平均年龄29.11±10.37岁。

500例ALT异常但抗-HCV阴性的血清来自宁波市第二医院输血科，年龄18~85周岁，平均年龄32.33±15.43岁。

1.2检测试剂 

HCV-cAgELISA购自山东莱博生物科技有限公司；

HCV-PCR试剂盒购自中山大学中山医学院达安基因诊断中心。

1.3检测方法

速率法检测ALT，酶联免疫法（ELISA）检测抗-HCV和HCV-cAg，RT-PCR检测HCV RNA，使用仪器为美国ABI公司的7500型荧光定量PCR仪，严格按试剂盒说明书进行操作，病毒载量＜103 拷贝/ml判定HCV RNA定量结果为阴性，103~105拷贝/ml为少量病毒复制，106~107拷贝/ml为中量病毒复制，＞1.0×108 拷贝/ml判定为大量病毒复制。所有试剂均在有效期内使用。

1.4统计学方法

应用统计软件spss13.0对相关数据进行统计学分析处理，采用χ²检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

二、实验结果

2.1 HCV-cAgELISA和HCV-PCR结果

83例抗-HCV阳性血清标本中，分别有33和36例HCV-cAg和HCV RNA阳性，阳性率分别为39.8%和43.4%。500例ALT异常但抗-HCV阴性的血清有3例HCV-cAg和HCV RNA均阳性.

2.2  HCV-cAg和HCVRNA检测结果的符合率

抗-HCV阳性血标本中HCV-cAg和HCV RNA均为阳性的32例，同为阴性的46例，抗-HCV阳性血标本中HCV-cAgELISA和HCV-PCR符合率为94.0%；另有1例HCV-cAg阳性而HCV RNA阴性，4例HCV RNA阳性而HCV-cAg阴性。

500例ALT异常但抗-HCV阴性的血清HCV-cAg和HCV RNA检测结果完全一致，HCV-cAg和HCV RNA符合率为100%。HCV RNA检测阳性判定为HCV确证阳性，HCV-cAgELISA方法的灵敏度为89.7%(35/39)，特异性为99.8％（543/544）。

2.3  HCV RNA拷贝数与HCV-cAg阳性检出率的相关性 

39例HCV RNA阳性血液中有35例HCV-cAg阳性，HCV-cAgELISA阳性检出率为89.7%。观察不同HCV RNA拷贝数血清样本HCV-cAgELISA阳性检出率，发现35例HCV-cAg和HCV RNA均阳性样本，HCV RNA拷贝数较高≥1.0×105拷贝/ml，而4例HCV RNA阳性但HCV-cAg阴性样本HCV RNA拷贝数较低，其中3例为103数量级。

ELISA检测抗-HCV仍是我国目前判断HCV感染的常规筛选方法，广泛用于无偿献血者、医院受血者HCV感染筛查及HCV感染实验室诊断，然而HCV感染到血清抗-HCV阳性要经历一个约40~70天的“窗口期”，这一时期ELISA抗-HCV试剂无法检出HCV感染［4-6］。

由于“窗口期”存在而导致输血性HCV感染的纠纷国内外都有报道［8,9］。为减少“窗口期”存在导致的HCV感染发生，欧美国家纷纷推出灵敏度更高的HCV-PCR和HCV-cAg ELISA检测HCV感染［4-6，8-10］。HCV RNA是病毒复制的直接标志，但该方法需要特殊仪器、且人员配备的要求高还受很多因素影响[5,6]。

血清HCV-cAg阳转仅比HCV RNA迟1~2d，用ELISA检测在仪器、人员配制要求比HCV-PCR易于满足，有文献报道HCV-cAgELISA用于血清抗-HCV阳转前的早期HCV感染的诊断以及HCV感染者治疗前后病毒血症情况的分析［4-7］。