丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床分析

孙胜菲1  于丽红2130021

长春中医药大学第一附属医院1   长春市产院2

摘　要　检测2003年1月～2006年12月间住院及门诊患者,150例丙型肝炎患者进行丙型肝病毒核心抗原(HCV-cAg)的检测并分析其临床意义。研究表明,HCV感染者肝癌的发生与C 抗原蛋白诱导肝细胞生长失控有关, HCV-cAg 阳性可提醒有癌变的可能。因此HCV-cAg可作为肝癌的辅助诊断。HCV-cAg的检测还可用于干扰素、抗病毒药物疗效的观察。

关键词　丙肝核心抗原　检测　临床分析

病毒性肝炎是由肝炎病毒引起的严重危害人类健康的传染性疾病,最常见的为甲型病毒性肝炎、乙型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎^{[1 ]} 。丙型肝炎是一种主要经血传播的传染病,其严重威胁人们身体健康,目前尚无特殊的防治方法。目前我国阻断丙型肝炎传播的主要方法是酶联

免疫吸附法( ELISA) 检测丙型肝炎抗体(抗- HCV) 筛选供血员。然而抗- HCV的出现是在HCV 感染后的6 - 12 周(窗口期) ,所以抗- HCV 阴性并不能排除携带HCV 具有传染性的可能。而HCV 核

心抗原(HCV-cAg) 的检测可将HCV的检测的窗口期缩短到15天，降低了HCV经血传播的风险。本文对150 例丙型肝炎患者进行丙型肝病毒核心抗原( HCV-cAg)的检测并分析其临床意义。

资料与方法

标本来源:本院住院及门诊患者150例(120 例抗-HCV 阳性,30 例抗HCV阴性) 。

试剂: 抗-HCV 检测试剂: HCV-cAg试剂:强生ORTHO , HCV-cAg酶免试剂盒批号:A GKl22 HCVRNA 荧光PCR 定量检测试剂:深圳匹基公司。

方法: ①抗-HCV 检测: ELISA 方法。②HCV-cAg 检测:设空白对照一孔,阴性对照,阳性对照各两孔,样本稀释液100μl/ 孔,待测标本1 00μl ,37 ℃孵育90分钟,洗板6 次,加酶结合物200μl ,37 ℃孵育30 分钟。再洗板6 次, 加显色剂200μl 。室温闭光30 分钟, 终止, 492nm

(参考波长630nm) 读板,Cut off = NCx +01040 。③HCVRNA 定量检测: 荧光定量PCR 法。

结　果

150 例血清标本HCV-cAg阳性47例( 31.3 %) , AL T 增高( 40～1000U/ L↑) 84 例(HCV-cAg 阳性占47 例、单独HCVRNA 阳性29 例,单独抗-HCV 阳性8 例) 。150 例丙型肝炎患者HCV检测结果见表。

表150 例丙型肝炎患者HCV 检测结果：

30 例抗-HCV 阴性而4 例HCV-cAg阳性者ALT 增高(分别为40U/ L 、53U/ L 、97U/ L 、158U/ L)。47 例HCV-cAg阳性标本中HBsAg阳性2 例(4.3 %) 。

讨　论

丙型肝炎是一种严重威胁人们身体健康,主要经血传播的传染病,在30 例抗-HCV 阴性标本中HCVCAg 阳性4 例(13.3 %) 提示,这些患者已经感染HCV ,但是由于抗-HCV的出现是在HCV感染后的6～12 周( 窗口期) ,所以抗-HCV 阴性并不能排除携带HCV 具有传染性的可能^{[2 ]} 。而HCV 核心抗原(HCV-cAg) 的检测可将HCV的检测的窗口期缩短到15 天,降低了HCV 经血传播的风险。另外,此4 名感染者肝功能出现不同的改变分别为40U/ L/ 、53U/ L 、97U/ L 、158U/ L) 。说明已影响到肝脏,但是由于窗口期或自身免疫的原因尚未产生抗体而呈阴性,因此应经常到医院进行检查。

由于HCV 的窗口期较长( 6～12周) ,HCV 的变异性大,目前抗-HCV 检测有可能出现漏检,所以采用更灵敏的检测方法很重要, HCV-cAg的检测有利于HCV感染病人的早期发现,特别是某些免疫功能紊乱、免疫功能低下的病人、某些不产生抗体的携带者。47 例HCV-cAg阳性标本中, 有2 例HBsAg 阳性(4.3 %) ,提示HCV-cAg作为病毒颗粒的结构之外,还具有基因调节功能, HCV

与HBV 联合感染的个体,C 抗原蛋白可影响HBV的组装。从检测结果表l看出, HCV-cAg阳性的标本, HCVRNA 都出现不同程度的增高,表明HCVCAg 可表达HCV 在体内复制的情况。由于HCVCAg 检测缩短感染窗口期,因此,用于献血者检测,可了解其HCV 感染的进程,阻断HCV 经血传播途径,减少丙型肝炎的感染率。47 例HCVCAg 阳性者ALT 都有不同程度的增高(40～1000U/L) ,表明HCV-cAg可破坏肝细胞,使肝脏受到损害。目前有很多方法进行丙肝抗体的检测,如抗-HCV E LlSA 法、胶体金法,丙肝病毒主要是通过输血及血液制品获得,流行病学资料显示:在肝癌发病率中等的地区,如日本、意大利、西班牙等国家多由丙型肝炎所致,也有资料表明发达国家的慢性肝病主要与HCV 感染有关研究表明,有资料表明发达国家的慢性肝病主要与HCV感染有关,有报道认为抗-HCV 阳性的急性肝炎中大部分进而演变发展为肝癌, HCV感染者肝癌的发生与C 抗原蛋白诱导肝细胞生长失控有关, HCV-cAg阳性可提醒有癌变的可能。因此HCV-cAg可作为肝癌的辅助诊断。HCV-cAg的检测还可用于干扰素、抗病毒药物疗效的观察。

    总之,由于输血后丙肝引起的医疗纠纷不断,这已引起了医学界的极大关注,而且受血次数越多,感染病毒的几率越高。如患者机体免疫力差,而输入的血液中肝炎病毒复制活跃,就会造成各种肝炎感染。HCV-cAg检测对丙型肝炎的预防传播,了解感染进程及病毒复制以及药物疗效观察、肝癌的辅助诊断有重要意义。

参考文献

1．苏娜. 615 例肝病患者血清丙型肝炎抗体的检测分析.国际检验医学杂志,2006,27(1):94

2．邢文革,石向东,陈光增,等. 国产丙型肝炎病毒抗体酶免检测试剂盒的质量评价. 中华肝脏病杂志,2001,9 (5):314